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022-66387942CST抗體以高特異性、靈敏度和穩(wěn)定性著稱,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)功能研究、信號(hào)通路分析及疾病機(jī)制探索。其核心產(chǎn)品線包括XP®系列兔單克隆抗體(采用XMT®技術(shù)開發(fā))和經(jīng)嚴(yán)格驗(yàn)證的多克隆抗體,覆蓋腫瘤標(biāo)志物、磷酸化修飾蛋白、細(xì)胞周期調(diào)控因子等靶點(diǎn)。
抗體形式
液體抗體:含50%甘油緩沖液(避免凍融),直接使用無需復(fù)溶。
凍干抗體:需用推薦緩沖液(如無菌水或含BSA的PBS)復(fù)溶。
包裝規(guī)格
常見規(guī)格:20μL、100μL、200μL、1mL。
配套試劑:推薦使用CST推薦的封閉液、二抗及顯色試劑(如SignalStain®系列)。
儲(chǔ)存溫度
未開封抗體:-20℃保存(含甘油,保持液態(tài));偶聯(lián)抗體(如HRP標(biāo)記)需4℃保存。
開封后抗體:建議分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融(注:CST不建議分裝,若必須分裝需確保無菌操作)。
有效期
單組分抗體:以管身“Ref:"后的灌裝日期為起始,通常為2年。
試劑盒:以條形碼標(biāo)簽日期為準(zhǔn),凍干細(xì)胞因子產(chǎn)品需在購買后12個(gè)月內(nèi)使用。
查閱說明書:確認(rèn)抗體的應(yīng)用范圍(如WB、IHC、IF)、推薦稀釋比例及種屬反應(yīng)性(如人、小鼠、大鼠)。
樣本處理:
細(xì)胞裂解液:推薦使用CST專用裂解緩沖液(如RIPA Buffer),加入蛋白酶/磷酸酶抑制劑。
組織樣本:福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣本需按說明書進(jìn)行抗原修復(fù)。
Western Blot(WB)
上樣量:20-30μg總蛋白,使用12% SDS-PAGE膠分離。
轉(zhuǎn)膜:濕轉(zhuǎn)法,推薦0.2μm硝酸纖維素膜(NC膜)。
封閉:5%脫脂牛奶(貨號(hào)#9999)室溫封閉1小時(shí)。
一抗孵育:4℃過夜(磷酸化抗體需延長反應(yīng)時(shí)間)。
二抗:抗兔/鼠HRP標(biāo)記二抗(貨號(hào)#7074/#7076),室溫孵育1小時(shí)。
免疫組化(IHC)
抗原修復(fù):推薦檸檬酸緩沖液(pH6.0)高壓修復(fù)。
阻斷:3% H?O?處理10分鐘,5% BSA封閉。
顯色:DAB或SignalStain®顯色試劑。
購買渠道
CST代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供CST抗體、試劑盒等,確保正品及售后支持。
抗體分裝禁忌
分裝可能導(dǎo)致濃度不均、污染或活性損失,CST不承擔(dān)分裝后質(zhì)量問題。
實(shí)驗(yàn)優(yōu)化建議
磷酸化抗體:需嚴(yán)格驗(yàn)證樣本刺激條件(如EGF處理15分鐘激活A(yù)kt)。
多色流式:搭配CompBeads微球調(diào)節(jié)熒光補(bǔ)償,避免通道干擾。
常見問題排查
無信號(hào):檢查樣本中靶蛋白表達(dá)水平(參考UniProt或BioGPS數(shù)據(jù)庫),確認(rèn)抗體稀釋比例及孵育時(shí)間。
高背景:縮短封閉時(shí)間,更換封閉液(如BSA替代脫脂牛奶)。
試劑類型 | 推薦產(chǎn)品(貨號(hào)) | 應(yīng)用場景 |
---|---|---|
封閉液 | SignalStain® Blocking Buffer (#12454) | WB/IHC/IF |
二抗 | Anti-Rabbit IgG HRP (#7074) | WB/IF |
顯色試劑 | SignalStain® DAB (#8059) | IHC |
注:更多產(chǎn)品信息請(qǐng)聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司。
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